產(chǎn)品名稱：人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）ELISA試劑盒

英文名稱：Human ICAM-1 ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：XFH12875

規(guī)格：48T/96T

儲(chǔ)存條件：2-8℃

有效期：6個(gè)月

用途：本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）的含量。

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！

背景介紹：

ICAM-1（細(xì)胞間粘附分子1）也被稱為CD54（分化簇54），是一種蛋白質(zhì)，由ICAM1基因編碼，通常在內(nèi)皮細(xì)胞和免疫系統(tǒng)細(xì)胞中表達(dá)。它與CD11a/CD18或CD11b/CD18型整合素結(jié)合，也被鼻病毒利用作為進(jìn)入呼吸道上皮的受體。ICAM-1是免疫球蛋白超家族的一個(gè)成員，該超家族的蛋白質(zhì)包括抗體和T細(xì)胞受體。它是一種跨膜蛋白，擁有一個(gè)氨基端胞外結(jié)構(gòu)域、一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)羧基端胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

檢測原理：

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15%

樣品收集、處理及保存方法

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

4.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果），稱重后將組織-剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

注：標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）ELISA試劑盒