小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)elisa試劑盒基本信息簡(jiǎn)介

ACE 是一種膜結(jié)合糖蛋白分子量為150000 含鋅屬二肽羧肽酶能使血管緊張素I(十肽由腎素轉(zhuǎn)化而來)肽鏈C 末端的組氨酸和亮氨酸殘基水解形成具有增壓作用的血管緊張素II(八肽) 后者通過與血管氣管平滑肌作用引起血管支氣管收縮ACE 也具有降血壓作用并參與緩激肽P 物質(zhì)等多肽性炎性物質(zhì)的滅活A(yù)CE 還能直接作用于腎上腺皮質(zhì)促進(jìn)醛固酮分泌因此ACE 是腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)以及緩激肽系統(tǒng)的重要調(diào)節(jié)因素影響人體多種生理機(jī)能ACE分布于全身各組織以肺副睪睪丸zui高其次為十二指腸胰卵巢主動(dòng)脈甲狀腺脾腎與肝的含量甚微此外巨噬細(xì)胞單核細(xì)胞人胎膜胎盤羊水和臍靜脈血也含此酶各組織ACE 主要定位于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞由于肺組織具有豐富的血管床且肺毛細(xì)血管床內(nèi)皮細(xì)胞所含的ACE 位于細(xì)胞外(外周血管床內(nèi)皮細(xì)胞所含的ACE 位于細(xì)胞內(nèi)) 促使血管緊張素I 轉(zhuǎn)化為血管緊張素II 的作用強(qiáng)且肺循環(huán)是體內(nèi)*不使血管緊張素II 滅活的血管床肺循環(huán)流出的血液中血管緊張素II 的含量zui高一般認(rèn)為血管內(nèi)皮細(xì)胞的ACE 與胞膜密切結(jié)合幾乎不釋放ACE 而巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生的ACE 大部分釋放入血故當(dāng)ACE 升高時(shí)應(yīng)考慮為巨噬細(xì)胞 單核細(xì)胞系統(tǒng)的分泌亢進(jìn)多數(shù)報(bào)道血清ACE 活性無性別年齡吸煙體位時(shí)間變化清醒睡眠狀態(tài)不影響ACE 的活性早產(chǎn)兒足月兒新生兒及健康成人的血清ACE 活性無明顯差別但李平生等 Ucer G.報(bào)道ACE 活性男大于女Ucer G.(1)等報(bào)道血清ACE 活性與吸煙年齡性別有關(guān),與氧分壓呈負(fù)性相關(guān)。

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)elisa試劑盒操作簡(jiǎn)介

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。

3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。

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