內(nèi)毒素定量檢測試劑盒的原理和用途-信帆生物

【用途】顯色基質(zhì)鱟試劑 ( Chromogenic End-point Tachypleus Amebocyte Lysate , CE TAL )用于體外細(xì)菌內(nèi)毒素的定量檢測，禁止以任何途徑進(jìn)入機(jī)體。

【原理】鱟試劑為鱟科動物東方鱟的血液變形細(xì)胞溶解物的冷凍干燥品,鱟試劑中 含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在適宜的條件下（溫 度，pH 值及無干擾物質(zhì)），細(xì)菌內(nèi)毒素激活 C  因子，引起一系列酶促反應(yīng)， 激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的顯色基質(zhì)，使其分解為 多肽和黃色的對硝基苯胺（pNA，λmax = 405nm） 。在一定時間內(nèi)，pNA 的 生成量與細(xì)菌內(nèi)毒素濃度成正相關(guān)，據(jù)此，可以定量供試品的內(nèi)毒素濃度。 同時，對硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化試劑染成玫瑰紅色（λmax = 545nm）， 避免了供試品本身的顏色對 405nm 處吸收峰的干擾。

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【檢測限】按反應(yīng)時間不同可檢測 0.1EU/ml-1 EU/ml 和 0.01EU/ml -0.1EU/ml 兩個區(qū) 間(  反應(yīng)時間 T 1  和 T 2  見出廠檢驗報告)  。

【試劑盒組成】

細(xì)菌內(nèi)毒素工作品，5 支  鱟試劑， 1.7ml/支，5 支 顯色基質(zhì)，1.7ml/支，5 支 偶氮化試劑 1，10ml/支，5 支 偶氮化試劑 2，10ml/支，5 支 偶氮化試劑 3，10ml/支，5 支  HCl (反應(yīng)終止劑)， 50ml/瓶，1 瓶

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水，50ml/瓶，3 瓶

【貯存】陰涼處,  * 2-8℃,避光貯存。

供試品的貯存與預(yù)處理
備注：   若供試品為血液類，請參照我廠配套血液相關(guān)處理試劑使用說明書。
1 供試品的 pH 值應(yīng)在 6 - 8 之間，若超出此范圍，需用無熱原緩沖液、0.1N 氫氧化鈉 或 0.1N 鹽酸調(diào)節(jié)。
2  若供試品中可能存在鱟實驗的干擾物質(zhì)，處理參見【供試品的干擾試驗】。
3 若供試品中可能含有β－葡聚糖（β－葡聚糖會產(chǎn)生 G 因子旁路反應(yīng)，干擾內(nèi)毒素 檢測），需選用特異性鱟試劑（我公司提供）。
4   若供試品為一些抗菌素如頭孢類抗菌素和磺胺制劑會對偶氮染色劑產(chǎn)生偶聯(lián)反應(yīng) 而干擾偶氮化顯色，需要選用不含偶氮化試劑的試劑盒（我公司提供）。
5 若供試品的本底吸光度值大于 0.5,必須對供試品進(jìn)行稀釋后再檢測。
6   若供試品顏色較深(例如溶血)，或在酸性條件下顏色加深(例如一些組織培養(yǎng)介質(zhì)), 必須設(shè)置供試品空白管以扣除供試品自身的顏色本底。 供試品空白管不加入鱟試劑，以等體積鱟試劑的溶劑(該處為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水) 代替。其余操作同供試品管。

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