高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測試劑盒樣本的處理方法！

高密度脂蛋白膽固醇（High density liptein cholesterol，HDL-C）主要在肝臟合成，是一種抗動脈粥樣硬化的脂蛋白，可將膽固醇從肝外組織轉(zhuǎn)運到肝臟進行代謝，由膽汁排出體外，其血漿含量的高低與患心血管病的風險呈負相關(guān)  。

高密度脂蛋白可以從細胞膜上攝取膽固醇，經(jīng)卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶催化而成膽固醇酯，然后再將攜帶的膽固醇酯轉(zhuǎn)移到極低密度脂蛋白和低密度脂蛋白上。高密度脂蛋白中膽固醇含量比較固定，約含有人體膽固醇總量的20%～30%。

樣本處理:

血清(漿)：直接測定，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。

培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分，離心 10分鐘，取上清測定。[注]：一般建議細胞密度在 100萬個/ml以上。

組織樣本：準確稱取組織重量，按重量(g)：體積(ml)=1：9的比例，加入 9倍體積的勻漿介質(zhì)，冰水浴條件下機械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心 10分鐘，取上清液待測。

[注]:1、如組織樣本為非高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進行提取。

細胞樣本：A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出，1000轉(zhuǎn)/分，離心 10分鐘，棄上清液，留細胞沉淀；用等滲緩沖液（ 0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗 1～2次，同樣 1000轉(zhuǎn)/分，離心 10分鐘，棄上清液，留細胞沉淀；B、細胞破碎:加入0.2～0.3ml的勻漿介質(zhì)（0.1mol/L、pH7～7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水）進行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率：300W,3～5秒/次，間隔30秒，重復3～5次)或手動勻漿，制備好的勻漿液不離心待測。也可采用裂解液裂解( TritonX-100，1～2%，裂解 30～40分鐘)，裂解好的液體不離心直接測定。 

生物療法：

生物療法是利用蛋白質(zhì)、DNA、抗體或其它從活組織中提取或合成的物質(zhì)獲得療效的方法。分子生物學技術(shù)的發(fā)展已使重組蛋白作為藥物以非腸道應用成為可能。

體內(nèi)試驗中較的是由apoA-I Milano和磷脂復合物組成的載脂蛋白，給動物模型和人類輸注這些載脂蛋白，結(jié)果證明減少了動脈粥樣硬化的發(fā)生。通過自身免疫方式產(chǎn)生針對膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白的中和抗體也正在試驗，以降低LDL-C和增加HDL-C為目的的基因療法已初步建立起來。

因此，僅以升高HDL-C水平并非是開發(fā)HDL-C治療新措施的*目標。一些新的治療措施是以進一步增強HDL對膽固醇逆向轉(zhuǎn)運作用為目標，直接的apoA-I治療和ABCA1，ABCG1基因表達調(diào)節(jié)研究正是這種新觀念的重要體現(xiàn)

高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測試劑盒樣本的處理方法！