維生素 B6 檢測試劑盒操作簡單，效果好

維生素 B6（Vitamin B6）又稱吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在，是一種水溶性維生素，肉類、全谷類、蔬菜和堅果類中含量較高。在機體中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝，對生物體具有極其重要的作用。
 

VB6 與 4-氨基安替比林在強氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物，在 400nm 有特征吸收峰?？梢姺止夤舛扔?酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器EP 管、冰和蒸餾水。
 

一、粗酶液提取：
組織：將樣品磨碎，按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加
入 0.6mL 提取液）加入提取液，60℃浸提 30min，加蒸餾水 0.4mL，混勻后于 25℃，16000rpm 離心
10min，取上清測定（動物組織及其他蛋白含量較高的樣本建議離心 20-30 分鐘或反復離心 2-3 次至
上清無混濁）。
 

細胞：按照細胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加
入 0.6mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；加蒸
餾水 0.4mL，混勻后于 25℃，16000rpm 離心 10min，取上清測定。
 

液體：直接檢測。
 

二、測定步驟：
1、分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 400nm，蒸餾水調(diào)零。
2、將 10mg/mL（10000μg/mL）標準液用試劑一稀釋為 500、250、125、62.5、31.2515.625 μg/mL的標準溶液備用。

三、維生素 B6 含量計算：
1、 標準曲線的繪制：
以各個標準溶液的濃度為 x 軸，其對應的△A 標準為 y 軸，繪制標準曲線，得到標準方程 y=kx+b，將△A 帶入方程得到 x（μg/mL）
2、 維生素 B6 含量的計算：
（1）按蛋白濃度計算
VB6（μg prot）= x×V 提取÷（V 提取×Crp）= x÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算
VB6（μg/g 鮮重）= x×V 提取÷W=x÷W
（3）按照細胞數(shù)量計算
VB6（μg/104 cell）= x×V 提取÷細胞數(shù)量（萬個）=x÷細胞數(shù)量（萬個）
（4）按液體體積計算
VB6（μg/mL）= x×V 提取÷V 提取= x
V 提?。禾崛∫后w積，1mL； V 樣：加入的樣品體積，0.04mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；
W：樣本質(zhì)量，g。
1、 A 大于 1.2 時，建議將樣品用試劑一稀釋后再進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
2、 蛋白濃度較高的樣品，比如動物組織、豆類種子等，若顯色完成后有沉淀產(chǎn)生，將樣本稀釋后再測定，在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
3、 顯色完成后立即進行測定，盡量保證反應時間一致。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。

2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和kou罩操作。