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快速研究測試出病毒
黃病毒有70多種,其中許多引起人類和動物疾病,包括登革熱,寨卡病毒和黃熱病病毒。Mariana Sequetin Cunha和合作伙伴Adolfo Lutz研究所的合作者已經(jīng)在巴西驗證了一種既快速又靈敏的新型黃病毒鑒定測試,該實驗室是向圣保羅州政府報告的領(lǐng)-先流行病學(xué)監(jiān)測實驗室。
有關(guān)該主題的文章已在病毒學(xué)檔案中發(fā)表。
該研究由圣保羅研究基金會(FAPESP)通過一個主題項目提供支持,該項目的主要研究人員(PI)是MaurícioLacerda Nogueira,而常規(guī)研究補助金則是Paulo Cesar Maiorka。
關(guān)鍵問題是RT-qPCR是否足夠靈敏以檢測所分析樣品中的少量病毒。塞奎汀回憶說,阿道夫·盧茨研究所保留了大量的深度冷凍小鼠,這些小鼠是在1990年代接種的,并儲存在-80°C下。她說:“我從他們的大腦中提取了遺傳物質(zhì),并尋求通過制備越來越稀的溶液來檢測不同黃病毒的閾值。”
已證明所建立的協(xié)議是高度敏感和特定的。它可用于檢測在巴西發(fā)生的不同黃病毒,并用于前哨動物和載體中的病毒監(jiān)測。
Sequetin告訴我們:“我們著手通過一種可靠的方法來改善對巴西黃病毒的監(jiān)測。為此,我們使用了RT-qPCR分析技術(shù)。”RT-qPCR代表逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反應(yīng)。實驗室技術(shù)利用聚合酶鏈反應(yīng)將RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA并擴增特定DNA靶標(biāo)。它被認(rèn)為是快速鑒定病毒的黃金標(biāo)準(zhǔn),并且被世界衛(wèi)生組織用于診斷SARS-CoV-2感染。
塞奎汀說:“直到近,巴西鑒定黃病毒的主要方法還是需要用從人類患者或動物身上提取的可疑物質(zhì)接種新生小鼠的大腦。”“當(dāng)我于2012年加入阿道夫·魯茲研究所(Adolfo Lutz Institute)擔(dān)任研究員時,我決定建立一種替代方法,該方法不需要老鼠,但可以將患者的血液,血清或內(nèi)臟樣品直接提交RT-qPCR。”