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革蘭氏染色液的使用!
革蘭氏染色法,是指細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種重要的鑒別染色法,屬于復(fù)染法。過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,乙醇脫色時(shí),肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類(lèi)脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出,因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染,呈紅色。這種染色法是由丹麥醫(yī)生革蘭于1884年所發(fā)明。
產(chǎn)品名稱(chēng):革蘭氏染色液
產(chǎn)品分類(lèi):微生物染色
產(chǎn)品規(guī)格:4x10ml /4x100ml /4x500ml
儲(chǔ)存條件:室溫,避光
產(chǎn)品組成:試劑(A): 結(jié)晶紫染色液 試劑(B): Gram碘液 試劑(C): 脫色液 試劑(D): 復(fù)紅復(fù)染液
自備材料:
1、接種環(huán)或挑取細(xì)菌的其他工具
2、酒精燈
3、載玻片
4、光學(xué)顯微鏡
實(shí)驗(yàn)步驟(僅供參考)
1、涂片:取待檢細(xì)菌,于載玻片中央涂成薄層或者或在載玻片上滴加少許無(wú)菌水,取菌與的水混合均勻,涂成一薄層。
2、干燥:涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥。
3、固定:手持載玻片一端,標(biāo)本面朝上,在酒精燈的火焰外側(cè)快速來(lái)回移動(dòng)3~5次,每次1s,溫度不宜過(guò)高,防止菌體蛋白變性,放置待涼后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
4、初染:滴加結(jié)晶紫染色液染色1~2min,清水沖洗去染色液;媒染:滴加Gram碘液,并覆蓋載玻片,室溫放置1~2min,水洗;脫色:滴加脫色液,搖動(dòng)10~30s,直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色時(shí)為止,立即用水沖去脫色液,終止反應(yīng);復(fù)染:滴加復(fù)紅復(fù)染液染色30~60s,水洗。
8、晾干多余水分,置油鏡觀察。
注意事項(xiàng):
1.本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!
2.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。