重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF預(yù)裝柱舉例使用

相關(guān)介紹：

重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF是將重組大消化鏈球菌蛋白L（Recombinant Peptostreptococcus magnus Protein L，簡(jiǎn)稱r-PPL）偶聯(lián)在高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠上的一種親和純化介質(zhì)。大消化鏈球菌蛋白L（PPL）能與抗體的κ輕鏈結(jié)合而不會(huì)影響抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，這一特性使其與結(jié)合抗體Fc區(qū)域的蛋白A、蛋白G相比，能更廣泛地結(jié)合各種來源及亞類的抗體。如人類的IgG、IgM、IgA、IgE、IgD，以及含κ輕鏈（人類1、3、4型，小鼠1型）的Fab、scFv等抗體片段。但不能與重鏈、λ輕鏈、κ輕鏈（2型）結(jié)合，所以重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF不能純化牛、山羊、綿羊、雞來源的抗體。

品  名：重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF

英文名：Recombinant Protein L NUPharose Fast Flow, rProtein L NUPharose FF

目錄號(hào)：NRPB52L、NRPB52S(預(yù)裝柱)

規(guī)  格：20 ml，100 ml，1L，1 ml預(yù)裝柱，5 ml預(yù)裝柱，特殊規(guī)格訂制

運(yùn)  輸：2 ~ 25℃，常壓、避光

貯  存：20%乙醇，2-8℃

應(yīng)用舉例：

結(jié)合緩沖液：20 mM磷酸鹽緩沖液（PB），pH 7.4

洗脫緩沖液：0.1 M檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，pH 2.7

中和緩沖液：1 M Tris-HCl，pH 9.0

1)1 ml重組蛋白L瓊脂糖凝膠FF預(yù)裝柱，用5~10個(gè)柱床體積的蒸餾水洗去保存液；

2)用結(jié)合緩沖液平衡 5~10個(gè)柱床體積；

3)將3 ml小鼠腹水用結(jié)合緩沖液稀釋至15 ml，0.45 μm濾膜過濾上樣；

4)用結(jié)合緩沖液平衡 5~10個(gè)柱床體積至基線；

5)用洗脫緩沖液洗脫抗體，收集洗脫峰，并用中和緩沖液調(diào)節(jié)其pH至中性；

6)每次使用后再用3~5個(gè)柱床體積的洗脫緩沖液再生清洗；

7)SDS-PAGE（圖1）電泳分析洗脫下來的小鼠單抗純度在95%以上。