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酪氨酸酶活性檢測試劑盒多種儀器都可以操作哦
產(chǎn)品說明:
酪氨酸酶(tyrosinase:EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶,是具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛
存在于植物、酵母和動物組織中。酪氨酸酶是生物體合成黑色素的關(guān)鍵酶,也是引起果蔬酶促褐變
的主要因素,同時也對昆蟲的免疫及生長有重要影響酪氨酸酶催化L-多巴生成多巴色素,其在475nm下有特征吸收峰,進(jìn)而測定出酪氨酸酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研
缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理:
(1)組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。12000g,4℃離心20min,取上清,置
冰上待測。
(2)細(xì)胞或微生物樣品的制備:先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每500萬細(xì)胞
或微生物加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)。12000g,
4℃離心20min,取上清,置冰上待測。
(3)血清(漿):直接檢測。
三、酪氨酸酶活力計算:
1、 按微量玻璃比色皿計算:
(1) 按蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化生成1nmol多巴色素的酶量定義為一個酶活性單位。
酪氨酸酶(U prot)=?A÷(ε×d)×V反總×109÷(V樣×Cpr)÷T =90.09×?A÷Cpr。
(2) 按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘催化生成1nmol多巴色素的酶量定義為一個酶活性單位。
酪氨酸酶(U/g 鮮重)=?A÷(ε×d)×V反總×109÷(W÷V提取×V樣)÷T =90.09×?A÷W
信帆生物對質(zhì)量的控制涵蓋生物試劑、放行、市場質(zhì)量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗(yàn)和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品的穩(wěn)定性。我們確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶要求的產(chǎn)品。
注意事項(xiàng): 1、當(dāng)分光光度計?A大于0.3或酶標(biāo)儀?A大于0.2時,建議將樣品用提取液稀釋后測量;?A過小時,建議增加酶促反應(yīng)時間(5min或10min)或增加加入的樣品體積來測定。 2、試劑一溶解后易氧化。溶解后盡快用完。