磷酸鈣法細胞轉(zhuǎn)染試劑盒注意無菌操作
信帆生物生物試劑的磷酸鈣法細胞轉(zhuǎn)染試劑盒(Calcium Phosphate Cell Transfection Kit),在傳統(tǒng)的磷酸鈣細胞轉(zhuǎn)染方法的基礎(chǔ)上 進行了改良,提高了轉(zhuǎn)染效率,并降低了毒性。用磷酸鈣法轉(zhuǎn)染細胞,不僅可以瞬時表達,也可以篩選穩(wěn)定株。
規(guī)格:200T
保存:—20℃
有效期:12個月
用途:用于磷酸鈣法轉(zhuǎn)染細胞,適合于大多數(shù)貼壁細胞的轉(zhuǎn)染
說明:HEK293是適合磷酸鈣法轉(zhuǎn)染的細胞之一,優(yōu)化條件后轉(zhuǎn)染效率可以高達85%以上,一般的轉(zhuǎn)染效率可達40~50%左右。注意無菌操作。
HEK293或HEK293T細胞,即通常所謂的293細胞,適合磷酸鈣法轉(zhuǎn)染的細胞之一,優(yōu)化條件后轉(zhuǎn)染效率可以高達 90% 以上;通常很容易達到40-50%左右的轉(zhuǎn)染效率。大多數(shù)常見的細胞例如Hela細胞、CHO細胞等也都適合磷酸鈣法轉(zhuǎn)染,但效率比293細胞要略低一些。
本試劑盒不僅適合于大多數(shù)貼壁細胞的轉(zhuǎn)染,也適用于一些懸浮細胞的轉(zhuǎn)染。本試劑盒提供的試劑都經(jīng)無菌處理,可以直接使用。
注意事項:
1、轉(zhuǎn)染時,把DNA-氯化鈣溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA-氯化鈣溶液中。 ?
2、高純度的質(zhì)粒是獲得高轉(zhuǎn)染效率的必要條件,要確保A260/A280大于1.8,并且電泳檢測抽提到的質(zhì)粒90 %以上都是超螺 旋。 ?
3、在用磷酸鈣法轉(zhuǎn)染細胞時應(yīng)使用濃度不高于5%的二氧化碳,二氧化碳的濃度為3%左右。 ?
4、BBS溶液的pH值直接關(guān)系到轉(zhuǎn)染效率,盡量避免把BBS溶液長時間暴露在空氣中,以免被空氣中的二氧化碳酸化。 ?
5、 轉(zhuǎn)染時由于質(zhì)粒不同、細胞不同,質(zhì)粒用量需自行摸索。 ?6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作