Product category
T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)批量到貨
T4 Polynucleotide Kinase,簡(jiǎn)稱T4 PNK,中文名稱T4多聚核苷酸激酶,是一種多聚核苷酸5'羥基激酶,可以催化ATP的γ位磷酸基團(tuán)向單鏈或雙鏈DNA、RNA、寡核苷酸或帶有3'磷酸基團(tuán)的單核苷酸的5'羥基轉(zhuǎn)移。其他NTP也可產(chǎn)生相同的反應(yīng):5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。
上述的磷酸化反應(yīng)是可逆的。當(dāng)缺失ATP并且存在ADP的情況下,T4 Polynucleotide Kinase可以顯示出5'磷酸酯酶的活性,催化單鏈或雙鏈DNA、RNA、寡核苷酸或帶有3'磷酸基團(tuán)的單核苷酸的5'磷酸基團(tuán)向ADP的轉(zhuǎn)移形成ATP。其他NTP也可產(chǎn)生相同的反應(yīng):5'-P + NDP → 5'-OH + NTP(適pH為6.4左右)。
當(dāng)ATP和ADP都適量存在時(shí),T4 Polynucleotide Kinase可以催化單鏈或雙鏈DNA、RNA、寡核苷酸或帶有3'磷酸基團(tuán)的單核苷酸的5'磷酸基團(tuán)和ATP的γ位磷酸基團(tuán)之間的交換反應(yīng)。其他NTP也可產(chǎn)生相同的反應(yīng):5'-P + NTP + NDP→5'-P + NDP + NTP。
T4 Polynucleotide Kinase同時(shí)具有3'磷酸酯酶活性,可催化3'磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化:3'-P → 3'-OH + Pi(適pH為5.9左右)。
T4 Polynucleotide Kinase的激酶活性在C-末端附近,而磷酸酯酶活性在N-末端附近。
用途:寡核苷酸、DNA或RNA的5'末端標(biāo)記,用作Southern、Northern、EMSA等的探針,凝膠電泳的marker,DNA測(cè)序引物,PCR引物等;使寡核苷酸、DNA或RNA的5'端磷酸化,確保后續(xù)連接反應(yīng)順利進(jìn)行;催化3'磷酸化的單核苷酸的5'磷酸化,使該單核苷酸可以和DNA或RNA的3'末端連接;去除3'端磷酸基團(tuán)。
注意事項(xiàng):
銨鹽沉淀獲得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的標(biāo)記反應(yīng)。銨鹽可強(qiáng)烈抑制T4 Polynucleotide Kinase的酶活性。
PEG可促進(jìn)磷酸化反應(yīng)速率和效率;交換反應(yīng)體系應(yīng)加入PEG。
酶使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。