PCR純化檢測(cè)試劑盒

本試劑盒采用*的離心吸附柱純化酶切、PCR 等反應(yīng)液中的 DNA 片段，同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其他有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒可回收 100bp-40kb 大小的 DNA 片段，回收率可達(dá) 80%以上（小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段回收率為 30-50%）。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：在使用本試劑盒前請(qǐng)閱讀此注意事項(xiàng)。

1.本試劑盒適用于無(wú)選擇性地回收溶液中所有 DNA 片段（可去除 50bp 以下的小片段），如需選擇性地回收特定片段，同時(shí)去除其他不同大小片段，請(qǐng)選擇瓊脂糖凝膠回收試劑盒。

2. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

3. 回收小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間。

操作步驟: （使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。）

 1、估測(cè) PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積，向其中加入 4 倍體積的結(jié)合液，充分混勻。如 PCR 反應(yīng)體系為 100ul,則加入 400ul 結(jié)合液。

2、將上一步所得溶液加入一個(gè)吸附柱中（吸附柱放入收集管中），室溫放置 2 分鐘，12000rpm 離心 30-60 秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。注意：吸附柱大容積為 800ul，若樣品體積大于 800ul 可分批加入。

3、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm 離心 30-60 秒，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

4、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

5、12000rpm 離心 2min，盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

 6、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 30-100ul 經(jīng) 65-70℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm 離心 2min，收集 DNA 溶液。