丙烯葡聚糖凝膠S系列現(xiàn)貨供應(yīng)
丙烯葡聚糖凝膠系列填料是烯丙基葡聚糖和N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺的交聯(lián)共聚物,平均粒徑為50μm,同時增加了基體的剛性,確??焖倭鲃犹匦院透叻直媛省?/span>
1 理化指標
測條件:層析柱16mm×600mm *柱床高60cm,25℃,流動相為0.1mol/LNaCl。
2 貯存
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇)通風(fēng)、干燥、清潔的地方,不能冷凍。用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇),保質(zhì)期:2年。
3 操作步驟
3.1 裝柱
(1)讓所有的材料和試劑均平衡至層析實驗的溫度。配制緩沖液,對所有的緩沖液進行脫氣處理。
(2)檢查層析柱所有部件,特別是過濾網(wǎng),密封圈,螺旋塞是否緊密,玻璃管是否干凈和完整。
(3)根據(jù)需要量取相應(yīng)量的凝膠,用去離子水清洗掉20%乙醇。
(4)將柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位,務(wù)必使底端無氣泡。
(5)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(6)打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定(注意壓力不要超過填料大耐壓)。
3.2 平衡
上樣前平衡層析柱至少5-10個柱體積,直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的pH值和電導(dǎo)值等于上柱Buffer的pH值和電導(dǎo)值)。
3.3 上樣
(1)樣品用平衡液配制,樣品一定要離心或過濾后上樣(0.45um濾膜),如果樣品鹽濃度太大,則需要處理后再上樣。
(2)的上樣量不超過柱體積的5%。
3.4 洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
3.5 再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。在一些應(yīng)用中,諸如變性蛋白質(zhì)或脂質(zhì)體物質(zhì)在再生過程中洗脫不掉。出現(xiàn)下面這些情況,是必須需要清洗再生的:
(1)背壓增加;
(2)色譜柱頂部的顏色變化;
(3)分辨率降低;
(4)轉(zhuǎn)換接頭和凝膠表面之間出現(xiàn)空隙。
如果觀察到壓力增大,在開始柱清潔程序之前先檢查管路中的各個過濾閥、過濾膜是否被污染,然后通過用0.1M NaOH洗滌柱子,除去沉淀的蛋白質(zhì),非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和脂蛋白。
4 注意事項
(1)上樣之前,樣品必須經(jīng)過膜過濾及去除色素,否則雜質(zhì)及色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。所有的緩沖液均需要用0.45um的過濾器過濾。
(2)在使用過程中,避免使用高濃度的強酸強堿,酸和堿的濃度應(yīng)低于0.1摩爾。堿會使流速變慢。
(3)不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻進行。