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土壤DNA提取試劑盒使用技巧
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適用于各類(lèi)土壤樣品中核酸的提取。樣本預(yù)處理采用陶瓷珠和二氧化硅顆粒混合而成的玻璃珠,可有效處理真細(xì)菌孢子和內(nèi)生孢子,革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,酵母,藻類(lèi),線蟲(chóng)和真菌等土壤中的各類(lèi)微生物。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司*新型材料,配合本公司*的裂解液配方可以可在40 min內(nèi)大限度的回收高純度核酸。提取的DNA純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,可適用于各種下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn),如酶切、PCR等實(shí)驗(yàn)。
運(yùn)輸與保存方法
室溫運(yùn)輸,室溫保存,有效期 12 個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1. 避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1. 自備設(shè)備和試劑:臺(tái)式離心機(jī)、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴,無(wú)水乙醇,離心管等。
2. 所有的離心步驟均在室溫完成,使用可以達(dá)到 12,000 rpm 轉(zhuǎn)速的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)
DNA 提?。?br/>1. 將 DNA 吸附柱套入 2 mL 收集管中,備用。
2. 將預(yù)處理混合液加入到 DNA 吸附柱中,12,000 rpm 室溫離心 1 min,棄掉廢液。
【注】:混合液每次大加入體積 700 μL,可分多次離心。
【注】:離心后,若濾膜仍有液體殘留,可延長(zhǎng)離心時(shí)間至 5 min。
3. 將 DNA 吸附柱放回收集管,加入 600 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室溫離心 30 sec,棄廢液。
【注】:確保漂洗液 W*已添加無(wú)水乙醇。
4. 重復(fù)一遍步驟 3。
5. 將 DNA 吸附柱放回收集管,空柱 12,000 rpm 室溫離心 2 min,以除去殘留的漂洗液 W*。
6. 將 DNA 吸附柱放入新的潔凈 1.5 mL 離心管中,在濾膜中央加入 30-100 µL 洗脫液,室溫放置 3 min。然后 12,000 rpm 離
心 1 min,收集濾液即為樣本 DNA。
【注】:可通過(guò)以下方式提高回收產(chǎn)量:①65℃預(yù)熱洗脫液;②將濾液再次上柱,室溫放置 3 min,洗脫。
7. 樣品 DNA 可置于-20℃短期保存,-80℃保存。
【注】:過(guò)量的 DNA 可能抑制下游 PCR 反應(yīng),遇到這種情況建議將 DNA 模板進(jìn)行稀釋后試用。